一种草莓微扩繁的液体培养方法

摘要

本发明提供一种草莓微扩繁的液体培养方法，包括步骤：材料的灭菌处理；诱导培养：接种到芽诱导培养基上，暗培养20-30h，然后转为光照培养；继代培养：光照培养25-35天后，茎尖发育为芽团，将芽团转移至继代培养基上进行继代培养，每25-35天更换一次继代培养基，共更换三次；增殖培养：每24小时浸入液体培养基1-8次，每次0.7-2min；生根培养：经过增殖培养的草莓脱毒苗每24小时浸入生根培养基1-8次。本发明提出的方法能够节省时间，完成一次培养的时间比传统的方式节约了5-6个小时，生产成本低，无须配置固体介质，减少了对琼脂的消耗，增殖系数高，相对于传统培养方法，其增殖系数增加了3-4倍。

主权项

一种草莓微扩繁的液体培养方法，其特征在于，包括步骤：1)材料的灭菌处理：取草莓匍匐茎新生的子株，清洗和灭菌处理；2)诱导培养：切取清洗和灭菌处理后的茎尖，接种到芽诱导培养基上，暗培养20‑30h，然后转为光照培养；所述芽诱导培养基为MS+6‑BA0.3～0.6mg/L+IBA0.1～0.2mg/L，蔗糖25～35g/L,琼脂5.5～6g/L，pH6.0～6.5的固体培养基；3)继代培养：光照培养25‑35天后，茎尖发育为芽团，将芽团转移至继代培养基上进行继代培养，每25‑35天更换一次继代培养基，共更换三次；所述继代培养基为MS+6‑BA0.3～0.7mg/L+NAA0.02～0.05mg/L，蔗糖25～35g/L,琼脂5.5～6g/L，pH6.0～6.5的固体培养基；4)增殖培养：选取继代培养阶段生长出的草莓脱毒苗，放入微扩繁装置中，将草莓脱毒苗每24小时浸入液体培养基6次，每次1min，所述液体培养基组成为MS+6‑BA0.3～0.6mg/L+IBA0.1～0.2mg/L，蔗糖15～25g/L，pH为6.0‑6.5的水溶液；5)生根培养：经过增殖培养的草莓脱毒苗每24小时浸入生根培养基6次，每次1min；所述生根培养基为1/2MS+IBA0.1～0.2mg/L，蔗糖15～25g/L，pH为6.0～6.5的液体培养基；所述步骤2)至5)中，培养的温度为22～28℃，湿度为40～80％；光照强度为1500～3000Lx，光周期为15～18h/9～6h。