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Método para genotipado en ensayos de tipado aplicados a una muestra biológica, conteniendo la muestra un ácido nucleico diana de interés y siendo el ácido nucleico diana susceptible de contener un polimorfismo mononucleotídico (SNP) bialélico, que comprende las etapas de: - efectuar una amplificación por NSABA o TMA de la diana, generando múltiples copias de amplicones, en presencia de al menos dos sondas marcadas diferentes, siendo cada sonda una baliza molecular que permite la detección instantánea de la posición de SNP tanto del tipo silvestre como de al menos una posible mutación, - evaluar el valor o valores de la variable discriminatoria basándose en las señales de cada combinación de dos sondas de detección, y - discriminar entre los genotipos basándose en el valor de la variable discriminatoria, en el que el valor de la variable discriminatoria para un genotipo heterocigótico es una relación seleccionada del grupo consistente en (kWT→WT + kWT→m)/(km→m + km→WT), (kWT→WT - kWT→m)/( km→m - km→WT), ( kWT→WT X kWT→m) / (km→m x km-→WT), ( kWT-→WT/kWT→m)/(km→m / km→WT) y sus recíprocos; el valor de la variable discriminatoria para un genotipo mutante homocigótico es una relación de kWT-m/km-m o su recíproco; y el valor de la variable discriminatoria para un tipo silvestre homocigótico es una relación de kWT→WT/km→WT o su recíproco. |
