一种鹰嘴豆组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种鹰嘴豆组培快速繁殖方法，首先配制基本培养基及各阶段培养基；选取大小均一皱粒鹰嘴豆种子进行消毒处理后萌发；待鹰嘴豆幼苗长至10cm左右，切取带腋芽的茎段于诱导培养基中培养；将初代幼芽接种于增殖培养基上，培养为继代幼芽；将继代幼芽接种到生根培养基中进行生根培养。本发明提供的利用鹰嘴豆成熟种子萌发形成带腋芽的小段为外植体快速繁殖鹰嘴豆的新方法，这一研究对今后鹰嘴豆转基因，遗传育种等研究提供技术支持和理论依据；为鹰嘴豆经济效益的提高和鹰嘴豆产量及品质的提高有一定的推动作用。

主权项

一种鹰嘴豆组培快速繁殖方法，其特征在于，该方法按以下步骤进行：配制基本培养基及各阶段培养基；选取大小均一皱粒鹰嘴豆种子进行消毒处理后萌发，利用1％次氯酸钠溶液灭菌10分钟，无菌水清洗5‑6次，无菌水浸泡一昼夜，次日超净工作台中，0.1％升汞浸泡1分钟，以无菌水冲洗并用无菌滤纸吸除表面水分后，接种于1／2MS培养基中，26±2℃，16／8光暗交替培养；待鹰嘴豆幼苗长至10cm左右，切取带腋芽的茎段于诱导培养基中培养，26±2℃温度下，16／8光暗交替培养，经20天左右培养至外植体诱导萌发出初代幼芽；将初代幼芽接种于增殖培养基上，在同上条件下经15‑20天培养至分化形成2‑5倍、芽长3‑5厘米的继代幼芽；将继代幼芽接种到生根培养基中进行生根培养，在相同条件下经30‑40天培养至幼苗基部长出8‑15条毛细根系，再经20‑30天培养至根长7‑10厘米；组培培养基包括基本培养基及各阶段培养基，各组分在每升中所含重量为：1)基本培养基：MS或1／2MS培养基，其中Gelzan2g，MgCl₂1.97g，pH5.7‑6.0；2)种子萌发培养基：1／2MS；3)诱导培养基：MS+2，4‑D0.5mg+6‑BA3mg；4)增殖培养基：MS+6‑BA2mg+IBA1mg；5)生根培养基：1／2MS+10g蔗糖+6‑BA2mg+IBA1mg。