过氧化物酶的荧光检测

摘要

本发明公开了从具有与过氧化物酶有反应性的生荧光底物产生荧光的方法。也提供了使用这些方法检测过氧化物酶或者过氧化物酶标记的分析物。描述了用于与过氧化物酶反应的生荧光化合物，组合物和试剂盒。描述了产生荧光化合物的两种模式。

主权项

产生荧光的方法，包括a)提供过氧化物酶和具有下列通式的荧光底物其中R¹是选自对于过氧化物的攻击呈惰性的基团，并仅包含选自C、H、N和O中的1到20个原子，R¹选自烷基、取代烷基、烯基、取代烯基、炔基、取代炔基、烷氧基、芳基、取代芳基、芳烷基、取代芳烷基、羧酸、羧酸盐、羧酰胺、烷基羧基酯、羧基酰肼基团、酮基、‑CHO、氨基、烷基氨基、芳基氨基以及氢原子；R²选自于甲基、苯基、苄基和4‑F苯基；R³到R¹⁰每一个都是仅包含选自C、H、N、O、S、P、Si和卤素中的1到20个原子的基团，基团R³到R¹⁰中每一个均为H或者除了一个以外其余都是H并且另一个是选自烷基、烷氧基、烷硫基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳基、烯基、炔基、卤素、羟基、巯基、磺酸酯、硫酸酯以及磷酸酯的基团中的一个；b)使过氧化物酶和荧光底物进行反应，以产生在反应中积累且不发生进一步反应的荧光产物，所述荧光产物具有下式c)用合适波长的光照射荧光产物，致使荧光产物发射荧光；条件是R¹不包括芳基酯、烷基酯(‑COOR)、烷基硫酯、芳基硫酯、磺酰亚胺、酰卤基或氰基基团，其中R被选自于卤素、氰基和硝基的吸电子基团所取代。