一种发酵生产透明质酸发酵液的方法

摘要

本发明属于发酵技术领域，涉及一种发酵生产透明质酸发酵液的方法，为了解决传统发酵温度并不能同时确保所生产透明质酸的高产量与高分子量的问题，本发明综合考虑了其它各种影响透明质酸产量及质量的因素，并着重对发酵温度进行了优化，结果发现发酵温度在40℃时，发酵效果最好，从而克服了在发酵温度这一因素调控上的技术偏见，并且采用本发明的发酵方法能够显著的降低发酵能耗，并一定程度上提高产量及质量。

主权项

一种发酵生产透明质酸发酵液的方法，以兽疫链球菌H23为发酵菌株，所述方法的步骤为：a、将兽疫链球菌H23接种至脑心浸出粉琼脂培养基上进行培养，于37℃培养16小时，得到兽疫链球菌H23菌体；b、配置500ml种子培养基：种子培养基的组成为：蔗糖20g/L，酵母粉15.0g/L，硫酸镁1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸锰0.03g/L，微量元素液20ml/L,缓冲液100ml/L；其中微量元素液的组成为：氯化钙1000mg/L，氯化锌100mg/L，硫酸锰30mg/L，硫酸铜80mg/L；其中缓冲液的组成为：磷酸氢二钠50g/L，磷酸二氢钠25g/L；配置好的种子培养基预先用质量百分比浓度为30%的氢氧化钠调节pH值至7.2后灭菌，将由步骤a所得的兽疫链球菌H23菌体接种至该种子培养基培养，于37℃震荡培养12小时，得到兽疫链球菌H23种子培养液；c、配置5L发酵培养基：发酵培养基的组成为：蔗糖100g/L，酵母粉15.0g/L，硫酸镁5.0g/L，磷酸二氢钠5.0g/L，硫酸钾3.5g/L，精氨酸0.15g/L，微量元素液10ml/L，缓冲液100ml/L；其中微量元素液的组成为：氯化钙4000mg/L，氯化锌200mg/L，硫酸锰35mg/L，硫酸铜160mg/L；配置发酵培养基后装入10L的发酵罐中，配置好的发酵培养基预先用质量百分比浓度为30%的氢氧化钠调节pH值至7.2后灭菌，将由步骤b所得的兽疫链球菌H23种子培养液接种至发酵培养液，接种后在搅拌转速为200‑300rpm，温度为40℃，pH值为7.0，通气量为1vvm条件下培养20小时，得到透明质酸发酵液，发酵过程中用质量百分比浓度为30%的氢氧化钠调节发酵液的pH值，使pH值保持在7.0±0.1之间。