从茶叶加工下脚料中制备高纯度单体儿茶素的方法

摘要

从茶叶加工下脚料中制备高纯度单体儿茶素的方法，包括提取茶多酚、分离出儿茶素并进行纯化，其工艺过程包含：以新鲜茶叶、剪枝茶叶、非发酵过茶叶的加工下脚料为原料，通过加入由纤维素酶、蛋白酶和果胶酶组成的复合酶进行酶解辅助提取茶多酚，然后用由CaCl₂和ZnCl₂组成的混合沉淀剂对茶多酚进行沉淀、大孔树脂层析柱一次分离、大孔树脂层析柱二次纯化，得到高纯度单体EGCG。本发明不用氯仿，从提取到精制到纯化过程衔接紧密，产品质量好，得率高。

主权项

从茶叶加工下脚料中制备高纯度单体儿茶素的方法，包括提取茶多酚、分离出儿茶素并进行纯化，其特征在于,工艺过程包含：A.原料取自新鲜茶叶、剪枝茶叶、非发酵过的茶叶加工下脚料，粉碎至20～80目；B.加水在酸性条件下加入由纤维素酶、蛋白酶和果胶酶组成的复合酶进行酶解，其中：加水量为茶叶干重的10～20倍，pH=3～6.5，复合酶组成比例为纤维素酶：蛋白酶：果胶酶=0.1～5：0.1～5：0.1～5，复合酶用量为茶叶干重的0.1～1%，温度40～65℃；C.过滤后酶解液用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩和/或干燥，得茶多酚粗品；D.将浓缩或/和干燥物加水成液体，调节pH5.6～6.5，加入CaCl₂和ZnCl₂混合沉淀剂；加水量为粗品干重的10～20倍，CaCl₂和ZnCl₂混合沉淀剂的混合比例=1：0.01～99，Ca²⁺和Zn²⁺的量之和与溶液中茶多酚的量的比例=0.01～0.05（mol/g）；E.滤出的沉淀物以稀盐酸转溶后直接经大孔树脂吸附，水洗后，再乙醇洗脱，浓缩乙醇洗脱液和/或干燥，得茶多酚精品；稀盐酸的浓度为0.1%～10%，水洗的水用量为大孔树脂体积的1～5倍，乙醇浓度为90%～99.5%；F.加水成液体，用大孔树脂吸附，水洗后再用乙醇水溶液洗脱，分别收集含EGCG，GCG，ECG纯度为98%以上的洗脱液；加水量为精品干重的2～5倍，水洗的水为去离子水，其用量为大孔树脂体积的1～5倍，之后乙醇水溶液洗脱的程序为：用1～3倍树脂体积量的10%乙醇水溶液洗脱——用1～3倍树脂体积量的20%乙醇水溶液洗脱——用1～3倍树脂体积量的30%乙醇水溶液洗脱——用1～3倍树脂体积量的90%～99.5%乙醇洗柱；G.加水使各洗脱液的乙醇浓度为1～10%；然后，H.再分别用与F同型号的大孔树脂吸附，用90～99.5%乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，冷冻干燥得成品。