一种可视的多个基因突变位点同时检测的方法

摘要

本发明公开了一种可视的多个基因突变位点同时检测的方法。本发明提供了一种检测或辅助检测待测DNA中突变位点的方法，包括以下步骤：1)以待测DNA为模板进行多重PCR扩增，得到PCR产物，2)用荧光物质标记步骤1)得到的PCR扩增产物，得到标记荧光物质的产物；3)将步骤2)得到标记荧光物质的产物与上述式(I)的化合物反应，观察反应产物的颜色确定所述待测DNA中的目标基因的突变位点；本发明的实验证明，本发明利用少量DNA就能够检测到多个基因的多个位点的突变情况，对于癌症的用药指导和早期诊断具有重要意义。

主权项

一种用于检测结肠癌病人PIK3CA基因的三个热点突变位点的四种突变情况的试剂盒，包括试剂a1和试剂a2：试剂a1由引物组1）、DNA聚合酶、dNTPs和PCR扩增缓冲液组成；引物组1）由引物对A和引物对B组成；引物对A由引物1和引物2组成，引物对B由引物3和引物4组成，引物1‑4的核苷酸序列依次为序列表中的1‑4；试剂a2由引物组H、荧光素标记的dUTP、德克萨斯红标记的dATP、DNA聚合酶和反应缓冲液组成或由引物组I、荧光素标记的dUTP、德克萨斯红标记的dATP、DNA聚合酶和反应缓冲液组成；引物组H由引物15和引物16组成；引物组I由引物17和引物18组成；引物15‑18的核苷酸序列依次为序列表中的15‑18；所述PIK3CA基因的三个热点突变位点的四种突变情况为E545K、H1047R、E542K或H1047L。