一种大规模深层发酵生产高抗癌成分蛹虫草菌粉的工艺

摘要

本发明属于中药材发酵生产技术领域。蛹虫草与冬虫夏草在药理、药性和临床效果上没有根本区别，被作为冬虫夏草的代用品用在癌症的辅助化疗。其主要抗癌成分为虫草素和生物活性多糖。本发明以自有保存的蛹虫草菌种为出发菌株，经一级摇瓶种子培养、二级摇瓶种子培养、发酵罐种子培养，最后放大到1.5吨发酵罐进行生产，发酵50-84h后，发酵液中菌丝体以干重计可达1.53％，干菌粉的虫草素含量达到1.28％，多糖含量可达5.28％(用硫酸-蒽酮法测定)，干菌粉中的铅、总砷含量低于国家限定标准。综合各发酵指标，该工艺具有较好的应用前景。

主权项

一种可大规模深层发酵生产高抗癌成分蛹虫草菌粉的工艺，其特征包括如下步骤：(1)一级摇瓶种子的培养：将蛹虫草斜面菌种接种于装有种子培养基的三角瓶中，放入25℃～28℃恒温摇床，在120～180rpm/min的转速下培养56～96h；(2)二级摇瓶种子的扩大培养：将一级摇瓶种子接种到装有种子培养基的三角瓶中，置于25℃～28℃恒温摇床，在120～180rpm/min的转速下培养56～96h；(3)种子罐的再扩大培养：将装有种子培养基的200L搅拌式发酵罐灭菌冷却后，调节pH值到5.0～6.5，将适量二级摇瓶种子接入种子罐中，保持培养温度为25～28℃，搅拌速度为50～150rpm/min(2h搅拌5‑10min)，通气量为1∶0.8V/V·min～1.5V/V·min，罐压0.03～0.06MPa，经40～50h培养，此时菌体湿重为20‑30g/100mL发酵液；(4)1.5吨发酵罐生产：将800L发酵培养基装入发酵罐，灭菌冷却后，调节pH值到6.0～7.0，将种子罐的种子移入发酵罐中，保持培养温度为25～28℃，搅拌速度为50～150rpm/min(2h搅拌5‑10min)，通气量为1∶0.5V/V·min～1∶1.5V/V·min，罐压0.03～0.06MPa，经60～85h培养结束发酵(要求此时发酵液变得粘稠，培养基pH降到3.8～4.8，发酵液中湿菌丝达到40g/100mL发酵液以上)；(5)发酵菌粉的制备：将发酵液经板框过滤放置12‑24h后，将湿菌体放置在60℃‑85℃的烘箱条件下烘6‑12h，将烘干的菌粉用机器进行粉碎，即为蛹虫草菌粉。