一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法

摘要

本发明公开了一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，包括如下步骤：将样品中可食部分切碎，捣碎，混匀，称取样品于离心管中，加入正己烷和乙酸乙酯，均浆提取，加入无水硫酸钠，再均浆提取，离心处理，取上清液加入到梨形瓶中，在水浴旋转浓缩至微干，加入正己烷和乙酸乙酯，超声溶解得到样品；加样前先用预淋洗萃取柱，然后取提取液转移到净化柱上，再用正己烷和乙酸乙酯混合液洗涤梨形瓶并转移入萃取柱，收集全部流出液；于水浴氮吹干；用流动相溶解并定容到1-2mL，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测样液；按色谱条件利用高效液相色谱仪进行测定。本发明的方法能准确的检测出灭螨醌和羟基灭螨醌的含量。

主权项

一种利用高效液相色谱仪测定灭螨醌和羟基灭螨醌的方法，其特征在于包括如下步骤：将样品中可食部分切碎，捣碎，然后混匀，准确称取精确到0.01g 的样品于100mL离心管中，加入体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，用高速组织捣碎机在11500‑12000r/min的转速下，均浆提取1‑2min，加入无水硫酸钠，再均浆提取1‑2min，在3500‑4000r/min的转速下离心5‑7mim，取上清液加入到50 mL梨形瓶中，在38‑40℃水浴旋转浓缩至微干，加入的体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯，超声30s‑35s充分溶解得到样品；加样前先用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯预淋洗萃取柱，然后从上述梨形瓶中取提取液转移到净化柱上，再用体积比为1:1的正己烷和乙酸乙酯混合液洗涤梨形瓶并转移入萃取柱，转入流速为1.5‑2mL/min，收集全部流出液；于38‑40℃水浴氮吹干；用流动相溶解并定容到1‑2mL，经0.45μm 滤膜过滤，滤液作为待测样液；按色谱条件利用高效液相色谱仪进行测定；如溶液色谱图在14.5‑16min之间出现波峰，则样品中含有羟基灭螨醌，如溶液色谱图在17.5‑19min之间出现波峰，则样品中含有灭螨醌；其中，色谱条件为：色谱柱：ZORBAX SB‑C18色谱柱 (250mm×4.6mm，10μm )，柱温室温25℃，进样量20μL；流动相：乙腈:0.1%磷酸=90:10（体积比），流速1.0mL/min，等度洗脱；检测器：二极管阵列检测器，检测波长250nm，采用色谱峰的保留时间定性，外标法定量。