一种高产β-丙氨酸的基因工程菌的构建、表达及应用

摘要

本发明提供了一种新的合成能力强、具有较高酶活的产β-丙氨酸的基因工程菌，以及这种高产工程菌的构建、表达和纯化，及其全细胞转化和发酵液直接转化合成β-丙氨酸的方法。合成方法为：通过基因工程的方法得到植物乳杆菌的L-天冬氨酸-α-丙氨酸脱羧酶(PanD)基因，基因序列号为NC_004567.2，将其构建到高效表达载体中，然后将高表达载体转化入受体菌，即得到所述的产β-丙氨酸的基因工程菌。所述基因工程菌经发酵培养，全细胞可转化80g/L底物，β-丙氨酸含量达到59.7g/L；在发酵液中直接投底物，转化浓度可达10g/L，β-丙氨酸含量达到6.8g/L，高于现有报道过的基因工程菌的合成能力。

主权项

一种高产β‑丙氨酸的基因工程菌，所述的方法是：通过基因工程的方法得到植物乳杆菌的L‑天冬氨酸‑α‑丙氨酸脱羧酶(PanD)基因，基因序列号分别为NC_004567.2，并在基因两端加上NdeI和XhoI酶切位点，并将基因构建到pET‑32a(+)载体中，得到PanDL.p基因的高表达载体pET‑32a(+)‑panDL.p，然后将高表达载体转化入受体菌，即得到所述的产β‑丙氨酸的基因工程菌。