一种检测α2珠蛋白基因点突变的巢式非对称PCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测α2珠蛋白基因点突变的试剂盒，该试剂盒由巢式非对称PCR扩增引物、荧光探针、淬灭探针、LADNA聚合酶等组成。通过巢式非对称PCR特异性扩增人类α2珠蛋白基因WS、QS、CS、CD30、CD31五个点突变目的序列、特异性荧光探针的分子杂交及解链分析，检测受检样本的α-地贫点突变基因型。该试剂盒对检测α-地中海贫血WS、QS、CS、CD30、CD31五个点突变位点的野生型和突变型具有良好的敏感性和准确性，重复性和稳定性很好，完全适用于α-地中海贫血点突变的临床检测。

主权项

用于检测α2珠蛋白基因点突变的巢式非对称荧光PCR试剂盒，所述试剂盒包括：（1）用于特异性扩增α2珠蛋白全序列的引物对；（2）用于扩增CD30/CD31目的片段DNA单链的引物；（3）用于扩增WS/QS/CS目的片段DNA单链的引物；（4）特异性检测α2珠蛋白基因WS、QS、CS、CD30、CD31五个点突变序列的野生型及突变型的荧光探针，以及相对应的淬灭探针，通过在荧光探针上修饰不同的荧光信号和/或不同的解链温度来区分WS、QS、CS、CD30、CD31五个点突变序列的野生型及突变型；所述用于特异性扩增α2珠蛋白全序列的引物对的Tm值比其他引物或荧光探针、淬灭探针的Tm值高5‑10℃。