一种优化的获得无选择标记转基因生物的双T-DNA表达载体及其应用

摘要

本发明公开了一种优化的获得无选择标记转基因生物的双T-DNA表达载体及其应用。本发明提供的双T-DNA载体A，为将双T-DNA区域插入表达载体中上得到的载体；所述双T-DNA区域包括两个独立T-DNA区域：T-DNA区域A和T-DNA区域B；所述T-DNA区域A的右边界A和所述T-DNA区域B的右边界相邻，且所述T-DNA区域A的左边界A和所述T-DNA区域B的左边界相离。本发明的实验证明，本发明构建的双T-DNA质粒两个T-DNA区的右边界在质粒环中相互靠近，形成头对头的结构（LB-RB-RB-LR型），以期避免在转录的时候形成通读，降低转化基因与选择标记基因的连锁比例，从而提高T1代分离出无选择标记转基因株系几率，具有广阔的应用前景。

主权项

一种双T‑DNA载体A，包括双T‑DNA区域，所述双T‑DNA区域包括T‑DNA区域A和T‑DNA区域B；所述T‑DNA区域A依次包括左边界A、选择标记基因表达盒和右边界A；所述T‑DNA区域B依次包括右边界B、第二个MAR、用于插入目的DNA的多克隆位点、第一个MAR和左边界B；所述T‑DNA区域A的右边界A和所述T‑DNA区域B的右边界相邻。