绒山羊皮肤用于透射电镜观察的超薄切片的制备方法

摘要

本发明涉及动物组织学技术领域的研究，具体涉及到在透射电镜下观察所用超薄切片的制作及染色方法。一种绒山羊皮肤用于透射电镜观察的超薄切片的制备方法，其主要特点在于包括有步骤为：（1）选取成年绒山羊，从体侧部用剪刀剪取0.8-1.2cm²的皮样；（2）样品的固定：（3）将步骤（2）固定好的皮样用0.1-0.2mol/L的磷酸缓冲液漂洗3次，每次10-15min；（4）置入2%的锇酸2-4℃，固定3-5h；（5）使用0.1-0.2mol/L的磷酸缓冲液漂洗3次，每次10-15min；（6）脱水；（7）包埋：在按1:1纯包埋剂和100%丙酮混合液中第一次浸透3-6h，然后在纯包埋剂中浸透10-12h。本发明的优点是流程简单，操作方便，获得的切片完整，图片结构清晰。适用于实验室科研工作者对绒山羊皮肤形态结构的研究。

主权项

一种绒山羊皮肤用于透射电镜观察的超薄切片的制备方法，其特征在于包括有步骤为：（1）选取成年的绒山羊，从体侧部用剪刀剪取0.8‑1.2cm²的皮样；（2）样品的固定：①第一次固定：剪取0.8‑1.2cm²的皮样，展平在事先准备好的玻璃片上，并置入放有第一次固定液的容器内固定，2‑4℃，6‑12h；②第二次固定：从第一次固定好的皮样上采取1‑1.2mm³的电镜样，置于2.5‑3%的第二次固定液中固定，2‑4℃，5‑6h；（3）将步骤（2）固定好的皮样用0.1‑0.2mol/L的磷酸缓冲液漂洗3次，每次10‑15min；（4）置入2%的锇酸2‑4℃，固定3‑5h；（5）使用0.1‑0.2mol/L的磷酸缓冲液漂洗3次，每次10‑15min；（6）脱水：使用50%‑100%酒精，脱水4‑6次，每次10min‑15min；使用100%丙酮脱水10‑15min；然后再次使用100%丙酮脱水10‑15min；（7）包埋：在按1:1纯包埋剂和100%丙酮混合液中第一次浸透3‑6h，然后在纯包埋剂中浸透10‑12h。