结合多肽及其用途

摘要

本发明提供DR5和HER-2的抗体或其抗原结合片段。抗体和/或其抗原结合片段包含具有高度限制性氨基酸序列多样性的变体CDR。本发明还提供这些多肽与异源多肽的融合多肽，所述异源多肽例如噬菌体或病毒外壳蛋白的至少一部分、标记和接头。此外，提供用于治疗癌症和免疫相关病症的组合物和方法。

主权项

选择结合特定靶标抗原的多肽的方法，所述方法包括：(A)制备包含大量多肽的组合物，其中所述多肽包含免疫球蛋白重链可变域和免疫球蛋白轻链可变域，其中：(i)CDRH1如氨基酸序列G‑F‑X1‑I‑X2‑X3‑X4‑X5‑I‑H(SEQ ID NO：22)所示，其中依照Kabat编号体系，G是位置26且X1是位置28；其中X1选自S和Y；其中X2选自Y和S；其中X3选自Y和S；其中X4选自Y和S；且其中X5选自Y和S；(ii)CDRH2如氨基酸序列X1‑I‑X2‑P‑X3‑X4‑G‑X5‑T‑X6‑Y‑A‑D‑S‑V‑K‑G(SEQ ID NO：23)所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置50；其中X1选自Y和S；其中X2选自Y和S；其中X3选自Y和S；其中X4选自Y和S；其中X5选自Y和S；且其中X6选自Y和S；(iii)CDRH3(a)如氨基酸序列X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19‑D‑Y(SEQ ID NO：24)所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置95，且其中X1‑X6各个位置上的氨基酸以摩尔比50％、25％和25％选自Y、S和G；其中X7‑X17各个位置上的氨基酸以摩尔比50％、25％和25％选自Y、S和G，或不存在；其中X18选自G和A；且其中X19选自I、M、L和F；(b)如氨基酸序列X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19‑D‑Y(SEQ ID NO：26)所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置95，且其中X1‑X6各个位置上的氨基酸以摩尔比25％、50％和25％选自Y、S和R；其中X7‑X17各个位置上的氨基酸以摩尔比25％、50％和25％选自Y、S和R，或不存在；其中X18选自G和A；且其中X19选自I、M、L和F；(c)如氨基酸序列X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19‑D‑Y(SEQ ID NO：27)所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置95，且其中X1‑X6各个位置上的氨基酸以摩尔比38％、25％、25％和12％选自Y、S、G和R；其中X7‑X17各个位置上的氨基酸以摩尔比38％、25％、25％和12％选自Y、S、G和R，或不存在；其中X18选自G和A；且其中X19选自I、M、L和F；(d)如氨基酸序列X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19‑D‑Y(SEQ ID NO：28)所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置95，且其中X1‑X6各个位置上的氨基酸以摩尔比20％、26％、26％、13％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％和1％选自Y、S、G、R、A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、T、V和W；其中X7‑X17各个位置上的氨基酸以摩尔比20％、26％、26％、13％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％、1％和1％选自Y、S、G、R、A、D、E、F、H、I、K、L、M、N、P、Q、T、V和W，或不存在；其中X18选自G和A；且其中X19选自I、M、L和F；或(e)如氨基酸序列X1‑X2‑X3‑X4‑X5‑X6‑X7‑X8‑X9‑X10‑X11‑X12‑X13‑X14‑X15‑X16‑X17‑X18‑X19所示，其中依照Kabat编号体系，X1是位置95，且其中X1‑X17各个位置上的氨基酸选自S，以及A、C、F、G、I、L、N、P、R、T、W或Y之一，或不存在；其中X18选自G和A；且其中X19选自F、L、I和M；(iv)CDRL1如氨基酸序列RASQDVNTAVA(SEQ ID NO：29)所示；(v)CDRL2如氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO：30)所示；且(vi)CDRL3如氨基酸序列Q‑Q‑X1‑X2‑X3‑X4‑P‑X5‑T(SEQ ID NO：25)所示；其中X1是位置91且选自Y、H和S；X2选自Y和S；X3选自Y、S和T；X4选自Y、S和T；且X5选自S、P和Y；(B)从所述组合物中选择一种或多种结合靶标抗原的多肽；(C)将一种或多种结合靶标抗原的多肽与不结合靶标抗原的多肽分离开；并(D)鉴定一种或多种对靶标抗原具有期望亲和力的结合靶标抗原的多肽，其中所述靶标抗原是HER2。