发明名称 猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法
摘要 本发明公开了一种猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法,它的步骤如下:(1)将PK15细胞复苏后培养于细胞瓶中长成细胞单层,用质量分数为0.25%的胰酶消化,然后加入DMEM生长液吹打,所述DMEM生长液含质量分数为10%的胎牛血清和质量分数为1%的双抗,分散细胞成单个,用系列稀释法进行细胞克隆;(2)通过间接免疫荧光筛选出对PCV2高敏感性的单细胞株。本发明采用更为方便高效的单细胞克隆技术获得一株对PCV2具有更高感染率的细胞系,命名为L8。通过对该细胞系的稳定性以及纯净性检测发现该细胞系能够稳定的提高PCV2在细胞内的增殖滴度。
申请公布号 CN103898044A 申请公布日期 2014.07.02
申请号 CN201410104575.8 申请日期 2014.03.20
申请人 河南农业大学 发明人 侯贤敏;郭敬;崔保安;郭官鹏;陈红英
分类号 C12N5/071(2010.01)I;C12R1/91(2006.01)N 主分类号 C12N5/071(2010.01)I
代理机构 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 代理人 张绍琳;张真真
主权项 一种猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法,其特征在于,它的步骤如下:(1)将PK15细胞复苏后培养于细胞瓶中长成细胞单层,用质量分数为0.25%的胰酶消化,然后加入DMEM生长液吹打,所述DMEM生长液含质量分数为10%的胎牛血清和质量分数为1%的双抗,分散细胞成单个,用系列稀释法进行细胞克隆;(2)通过间接免疫荧光筛选出对PCV2高敏感性的单细胞株。
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