摘要 |
<p>Verfahren zur hochauflösenden 3D-Lokalisierungsmikroskopie einer Fluoreszenzemitter enthaltenden Probe (2), bei dem–die Fluoreszenzemitter in der Probe zur Abgabe von Fluoreszenzstrahlung angeregt werden und die Probe mit einer Ortsauflösung im Weitfeld (4) abgebildet wird,–die Anregung so bewirkt wird, dass bezogen auf die Ortsauflösung mindestens einige Fluoreszenzemitter isoliert sind, und–in einer Lokalisierungsanalyse (S3) eine dreidimensionale Ortsangabe, die in Tiefenrichtung der Abbildung eine z-Koordinate und orthogonal dazu eine x- und eine y-Koordinate umfasst, für jeden isolierten Fluoreszenzemitter mit einer Genauigkeit bestimmt wird, die über die Ortsauflösung hinausgeht, wobei–eine Lokalisierungsunsicherheitstabelle (15) bereitgestellt wird, die eine Unsicherheit der Ortsangabe, und zwar zumindest hinsichtlich deren z-Koordinate als Funktion der z-Koordinate und einer Anzahl von Photonen, die bei der Abbildung im Weitfeld (4) aufgesammelt wurden, angibt und–für jeden lokalisierten Fluoreszenzemitter unter Zugriff auf die Lokalisierungsunsicherheitstabelle (15) eine Ortsangabenunsicherheit für die in der Lokalisierungsanalyse bestimmte Ortsangabe ermittelt wird.</p> |