酵母菌和枯草芽孢杆菌复合微生态制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种酵母菌和枯草芽孢杆菌复合微生态制剂的制备方法，它包括三大步骤，液体菌液的培养、固体基料的配制、固体基料与液体菌液的混匀，具体制备步骤为：把固体基质与液体菌液按重量百分比为1：1比例混合，搅拌均匀后装盘，入无菌培养室，恒温40℃，通风，浅盘发酵36小时，可见浅盘表面和内层均长满白色菌体，提高温度至60℃，加大风量，干燥出料，测得活菌浓度1×10⁹cfu/g，粉碎分装，即得产品。本发明的制备工艺简单并易于控制，不易染杂菌，菌株浓度高，后加工成本低，生产环境友好。

主权项

一种酵母菌和枯草芽孢杆菌复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：它包括三大步骤，液体菌液的培养、固体基料的配制、固体基料与液体菌液的混匀；所述液体菌液的培养包括以下具体步骤：一、平板培养：酵母菌和枯草芽孢杆菌保存菌种划线接种至平板培养基，其培养基配料为葡萄糖16g，蛋白胨2g，牛肉膏3g，氯化钠5g，硫酸锰5mg，琼脂15g，蒸馏水1000ml，PH值为7，121℃灭菌，32℃培养30h；二、试管接种：取发育健壮、菌落典型的菌株接种10ml，其培养基配料为葡萄糖16g，蛋白胨2g，牛肉膏3g，氯化钠5g，硫酸锰5mg，蒸馏水1000ml，PH值为7，121℃灭菌，35℃培养24h；三、分别用三角瓶接种100ml，其培养基同步骤二，121℃灭菌，35℃培养12h；四、分别用三角瓶接种1000ml，其培养基同步骤三；五、用10L种子发酵罐培养，培养液为7L，培养基同步骤三，PH值为7，121℃灭菌30分钟，培养温度为37℃，转速150r/min，通气量3vvm，指每分钟通入单位发酵体积m3的空气体积m3，培养18h；六、用100L种子发酵罐培养，培养液为100L，培养基按豆粕粉2g，鱼粉2g，120目的玉米粉0.5g，葡萄糖3g，氯化钠0.2g，硫酸锰0.3g，增效剂0.1g，水1000ml的比例配制，按步骤五的方法培养，所选增效剂为硫酸锌、硫酸铁和硫酸铜按等量配比而成；七、用1000L发酵罐，培养基分别以步骤六中100L种子发酵罐的配比乘以七倍，发酵方法同步骤五，培养24h；所述固体基料按以下成分配制：花生壳或棉籽壳500kg，玉米粉150kg，豆粕粉200kg，麸皮100kg，葡萄糖5kg，总重量为1000kg，搅拌混匀后加200kg水，润湿后蒸煮灭菌，待冷却至35℃时，加入液体菌液的培养的步骤七中的发酵液700kg；固体基料与液体菌液的混匀具体制备步骤为：把固体基质与液体菌液按重量百分比为1：1比例混合，搅拌均匀后装盘，入无菌培养室，恒温40℃，通风，浅盘发酵36小时，可见浅盘表面和内层均长满白色菌体，提高温度至60℃，加大风量，干燥出料，测得活菌浓度1×10⁹cfu/g，粉碎分装，即得产品。