发明名称 一种提取质粒DNA的试剂和方法
摘要 本发明公开了一种提取质粒DNA的试剂和方法,它包括菌体裂解试剂、蛋白质抽提试剂、质粒DNA沉淀试剂和质粒DNA溶解试剂。用本发明所述提取质粒的方法提取质粒操作时间短,提取质粒平均时间为8分钟;本发明所用提取质粒的试剂组成简单,均为常见实验试剂,来源广泛且价格低,各组分均可以采用国产分析纯就可以提取到高产量和纯度的质粒,大大降低了费用;获得的质粒DNA产量高,纯庋好,无杂蛋白和RNA的污染,提取到的质粒DNA可以直接用于酶切、连接、测序、原核转化和真核转染等实验,大大方便了生物实验操作,节省了实验时间,提高了实验效率。
申请公布号 CN103882007A 申请公布日期 2014.06.25
申请号 CN201210563585.9 申请日期 2012.12.24
申请人 苏州中同生物科技有限公司 发明人 杨艳菊;何胜祥
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种提取质粒DNA的试剂,其特征在于它包括菌体裂解试剂、蛋白质抽提试剂、质粒DNA沉淀试剂和质粒DNA溶解试剂;所述菌体裂解试剂的组分为:10mM Tris‑HCl、1mM EDTA、150mM氯化钠和5mg/ml溶菌酶,以超纯水为溶剂,所述Tris‑HCl的PH值为7.5‑7.8;所述蛋白质抽提试剂的组分为酚和氯仿的体积比为1∶1的混合物;所述质粒DNA沉淀试剂的组分是PH为7.5的5.5M醋酸钠溶液和无水乙醇,其中醋酸钠溶液和无水乙醇体积比为1∶4;所述质粒DNA溶解试剂的组分为含有0.15mg/ml RNase的超纯水。
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