发明名称 |
一种用于检测小麦条锈菌细胞周期依赖性蛋白激酶2基因(Cdc2)SNP位点的方法 |
摘要 |
一种用于检测小麦条锈菌细胞周期依赖性蛋白激酶2基因(Cdc2)SNP位点的方法,使用引物对条锈菌DNA在本发明规定的反应体系和反应条件下进行PCR扩增,然后测序,经过与标准序列比对,从而检测到所测序列的SNP位点,引物对:正向引物Cdc28S:5'AAATCATCCACATCTGCTCCAC3',反向引物Cdc352A:5'TCCTACAAACCCCTCCAA3'。PCR反应体系:为30μl,其中,样品DNA,20ng/μl,1.5μl;PrimerS和A(10μM)各1.5μl;2×TaqPCRMasterMix,15μl;ddH2O,10.5μl。2×TaqPCRMasterMix成分:0.1UTaqPolymerase/μl,500μMdNTPeach,20mMTris-HCl(PH8.3),100mMKCl,3mMMgCl<sub>2</sub>,其它稳定剂和增强剂。PCR反应条件:(96℃,5min)1cycle;(96℃,25s,62℃,25s,72℃,45s)34cycles;72℃延伸5min。 |
申请公布号 |
CN103882141A |
申请公布日期 |
2014.06.25 |
申请号 |
CN201410137952.8 |
申请日期 |
2014.04.08 |
申请人 |
云南省农业科学院农业环境资源研究所 |
发明人 |
李明菊;陈万权;刘太国;段霞瑜;张庆;程加省;毕云青;徐志 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 |
代理人 |
汤东凤 |
主权项 |
一种用于检测小麦条锈菌细胞周期依赖性蛋白激酶2基因(Cdc2)SNP位点的方法,使用引物对条锈菌DNA在特定的反应体系和条件下进行PCR扩增,然后测序,经过与标准序列比对,从而检测到所测序列的SNP位点,引物对:正向引物Cdc28S:5'AAATCATCCACATCTGCTCCAC3',反向引物Cdc352A:5'TCCTACAAACCCCTCCAA3'。 |
地址 |
650200 云南省昆明市盘龙区龙泉办事处桃园村 |