戊型肝炎病毒抗原的制备方法及其产品

摘要

本发明提供了一种制备戊型肝炎病毒空衣壳抗原的方法，包括：将戊型肝炎病毒抗原基因或优化后的戊型肝炎病毒抗原基因分别克隆到杆状病毒运载载体中，构建得到重组杆状病毒转移表达载体；将其与杆状病毒DNA进行共转染，获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫宿主或昆虫细胞；诱导重组戊型肝炎病毒抗原表达；收获并纯化所表达的重组抗原，即得。本发明方法采用杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中安全、高效的表达戊型肝炎病毒抗原，所制备的抗原免疫活性高、安全性极高，可直接用于生产注射和口服疫苗用以免疫动物或人。本发明方法可大幅度降低戊型肝炎病毒抗原的生产成本，具有安全、高效、能耗少、成本低等诸多优点。

主权项

一种制备戊型肝炎病毒抗原的方法，其特征在于，包括：将戊型肝炎病毒抗原基因或优化后的戊型肝炎病毒抗原基因分别克隆到杆状病毒运载载体中，构建得到重组杆状病毒转移表达载体；将所构建的重组杆状病毒转移表达载体与家蚕杆状病毒BmNPV DNA进行共转染，将戊型肝炎病毒抗原基因或优化后的戊型肝炎病毒抗原基因分别转移到家蚕杆状病毒的基因组上获得重组家蚕杆状病毒；用重组家蚕杆状病毒感染家蚕或家蚕细胞；培养被感染的家蚕或家蚕细胞诱导重组戊型肝炎病毒抗原表达；收获并纯化所表达的重组戊型肝炎病毒抗原，即得；所述的戊型肝炎病毒抗原基因为戊型肝炎病毒空衣壳蛋白ORF2基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示；所述优化后的戊型肝炎病毒抗原基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示；所述的杆状病毒运载载体选自pBM034,pBM93,AcRP23‑lacZ,AcRP6‑SC,AcUWl‑lacZ,BacPAK6,Bac to Pac,Bacmid,p2Bac,p2Blue,p89B310,pAc360，pAc373,pAcAB3，pAcAB4，PAcAS3,pAcC129，pAcC4，DZI,pAcJPl,pAcMLF2，pAcMLF7，pAcMLF8,pAcMPl，pAcMP2,pAcRP23，pAcRP25,pAcRW4,pAcsMAG,pAcUWl，pAcUW21，pAcUW2A，pAcUW2B，pAcUW3，pAcUW31，pAcUW41，pAcUW42，pAcUW43，pAcUW51,pAcVC2，pAcVC3,pAcYMl,pAcJcC5,pBacl，pBac2,pBlueBacIII,pBlueBacHis,pEV55，mXIV,pJVNhel,pJVP10,pJVrsMAG,pMBac,pP10,pPAKl,pPBac,pSHONEX1.1,pSYN XIV VI+,pSYNVI+wp,pSYNXIV VI‑,pVL1391，pVL1392，pVL1393，pVL941，pVL945，pVL985,pVTBac,pBM030或pUAC‑5。