肿瘤靶向药物有效性检测、突变富集方法、引物对及试剂

摘要

本申请涉及肿瘤基因领域，公开了肿瘤靶向药物有效性检测、富集突变方法、引物对及试剂。本申请的方法，包括检测受体内肿瘤靶向药物关联基因的基因突变情况，其关联基因包括EGFR、KRAS和BRAF中的至少一个，具体可采用包括COLD-PCR扩增步骤及测序步骤的方法。本申请还公开了一组引物对，一种包括该引物对的试剂和试剂盒。本申请通过对EGFR，KRAS和BRAF三个基因的突变情况进行检测，可为肿瘤靶向药物有效性提供指导。通过以本申请公开的引物对进行COLD-PCR扩增可富集突变，将扩增结果测序可使常规PCR/sanger测序法检测突变率的灵敏度从原来的20%提高到1%，大大的降低了检测的假阴性率。

主权项

一种肿瘤靶向药物有效性的检测方法，包括检测受体内肿瘤靶向药物关联基因的基因突变情况，其特征在于，所述肿瘤靶向药物关联基因包括EGFR基因、KRAS基因和BRAF基因中的至少一种；优选的，所述检测受体内肿瘤靶向药物关联基因的基因突变情况包括检测受体内以下a‑h中至少一类突变位点中的突变情况：a、EGFR基因第709和/或719号密码子；b、EGFR基因第746‑750号密码子；c、EGFR基因第790号密码子；d、EGFR基因第858号密码子；e、KRAS基因第12和/或第13号密码子；f、KRAS基因第61号密码子；g、KRAS基因第146号密码子；h、BRAF基因第600号密码子。