酮还原酶多肽及其用途

摘要

本发明提供与天然存在的野生型酮还原酶相比具有改进性质的人工改造的酮还原酶。还提供了编码人工改造的酮还原酶的多核苷酸、能够表达人工改造的酮还原酶的宿主细胞和使用人工改造的酮还原酶来合成各种手性化合物的方法。

主权项

一种能够以SEQ ID NO:4多肽速率的至少1.5倍的速率将底物2‑[3‑[3‑[2‑(7‑氯‑2‑喹啉基)乙烯基]苯基]‑3‑氧代丙基]苯甲酸甲酯转化为产物(S,E)‑2‑(3‑(3‑(2‑(7‑氯喹啉‑2‑基)乙烯基)苯基)‑3‑羟丙基)苯甲酸甲酯的酮还原酶多肽，其包括与具有下述特征的基于SEQ ID NO:2、4或114的参考序列至少85%相同的氨基酸序列：对应于X190的残基是脯氨酸，对应于X195的残基是精氨酸，而且对应于X202的残基是色氨酸，并且其中所述酮还原酶多肽的对应于X190的残基是脯氨酸、对应于X195的残基是精氨酸、而且对应于X202的残基是色氨酸，其中所述酮还原酶多肽能够将所述底物转化为具有至少99%的百分比立体异构过量的所述产物，其中所述酮还原酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO:6、8、10、12、14、16、18、20、22、26、28、30、32、34、36、50、64、76、78、80、82、84、108和110。