一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法

摘要

本发明公开了一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法，包括：高雄山虫草GZUIFR-PT211菌丝段接种液的制备；选取大小均一的蚕蛹，用5%的聚维酮碘液擦涂或喷施于蚕蛹体表，作用5min后用无菌水漂洗3次，再用1mol/lNaOH擦涂或喷施于蚕蛹体表，作用5min后用无菌水漂洗3次，沥干水分后，取蚕蛹浸蘸浓度大于10⁶个菌丝段/ml的高雄山虫草GZUIFR-PT211菌丝段接种液，而后置于用滤纸加无菌水保湿的平皿内，在20-23℃培养，3-5天后大部蚕蛹变硬，再保湿培养3-5天后从蛹体的节间先长出菌丝体和很细小的子实体，进行12h见光培养，12h暗培养，到25-30天时即可收获子实体。本发明能大幅度提高通过体表对家蚕的侵染率、成本较低且易于规模化培养。

主权项

一种提高高雄山虫草体表侵染家蚕产子实体率的方法，包括以下步骤：（1）高雄山虫草GZUIFR‑PT211菌丝段接种液的制备：在PDA培养基上活化高雄山虫草GZUIFR‑PT211菌种，然后将活化好的菌种接种到液体种子培养基中，摇床常规培养3‑4天后即可备用；制备菌丝段接种液：使用菌丝段生产培养基，接种量20ml/l，摇床转速为200 r/min，26℃下培养96h，将培养好的发酵液用灭菌的双层滤纸过滤即得到高雄山虫草GZUIFR‑PT211的菌丝段接种液；（2）体表侵染及子实体的人工培养选取大小均一的蚕蛹，用5%的聚维酮碘液擦涂或喷施于蚕蛹体表，作用5min后用无菌水漂洗3次，再用1mol/l NaOH擦涂或喷施于蚕蛹体表，作用5min后用无菌水漂洗3次，沥干水分后，取蚕蛹浸蘸浓度大于10⁶个菌丝段/ml的高雄山虫草GZUIFR‑PT211菌丝段溶液，而后置于用滤纸加无菌水保湿的容器内，在20‑23℃培养，3‑5天后大部蚕蛹变硬，再保湿培养3‑5天后从蛹体的节间先长出菌丝体和很细小的子实体，此时将感染的蚕蛹放入较大容器，进行12h见光培养，12h暗培养，在暗培养阶段降低培养温度5℃培养，在侵染20‑25天时已生长旺盛，到25‑30天时子实体大部分表面披一层白色的孢子粉，此时，子实体已经成熟。