发明名称 一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法
摘要 本发明公开了一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法,其包含步骤:(1)用C1~C4的醇或酮浸泡含WF11899A的发酵液0.5~3h后,固液分离;(2)去除液体部分中的醇或酮后,过大孔吸附树脂,以甲醇水溶液洗脱,收集洗脱液减压浓缩,得浓缩液;(3)将浓缩液通过聚苯乙烯反相色谱柱,以乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液洗脱,HPLC跟踪检测,分段收集WF11899A纯度大于90%的洗脱液,并减压浓缩得浓缩液;(4)将步骤(3)所得的浓缩液上样于聚苯乙烯反相色谱柱,用纯水冲洗脱盐,然后以纯甲醇洗脱,所得洗脱液即为含有WF11899A的洗脱液。本发明方法对WF11899A的提取纯度较高,收率高,纯化工艺简单,为从发酵液中分离纯化WF11899A提供了一种高效率低成本的工业化方法。
申请公布号 CN103848900A 申请公布日期 2014.06.11
申请号 CN201210514096.4 申请日期 2012.12.04
申请人 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 发明人 芦现杰;胡海峰;朱宝泉;张长清
分类号 C07K7/56(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I 主分类号 C07K7/56(2006.01)I
代理机构 上海弼兴律师事务所 31283 代理人 朱水平;沈利
主权项 一种从发酵液中分离纯化WF11899A的方法,其特征在于,其包括如下步骤:(1)用C1~C4的醇或酮浸泡含WF11899A的发酵液0.5~3h后,将发酵液进行固液分离,取液体部分;所述的C1~C4的醇或酮与含WF11899A的发酵液的体积比为1︰2~3︰1;(2)去除步骤(1)得到的液体部分中的C1~C4的醇或酮后,过大孔吸附树脂,以甲醇水溶液洗脱,收集洗脱液,并减压浓缩,得浓缩液;(3)将步骤(2)所得的浓缩液通过聚苯乙烯反相色谱柱,以乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液洗脱,对洗脱过程进行HPLC跟踪检测,分段收集WF11899A纯度大于90%的洗脱液,并减压浓缩,得浓缩液;在所述的乙腈、磷酸二氢铵和水的混合溶液中,乙腈的体积百分比为40%~60%,磷酸二氢铵的质量百分比为0.4%~0.6%;(4)将步骤(3)所得的浓缩液上样于聚苯乙烯反相色谱柱,用纯水冲洗脱盐,然后以纯甲醇洗脱,所得洗脱液即为含有WF11899A的洗脱液。
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