发明名称 一种快速测定真菌微生物农药中活孢子含量的方法
摘要 本发明公开了一种快速测定真菌微生物农药中活孢子含量的方法,包括:(1)在真菌培养基中加入以重量计0.25‰~5‰的脱氧胆酸钠并制备成平板;(2)将真菌微生物农药样品在含吐温20或聚乙二醇辛基苯基醚的灭菌水中浸泡、振荡;(3)进行倍数梯度稀释,分别将不同稀释度的样品均匀涂布在平板上,室温下培养48~120h;(4)统计菌落数,菌落数在30个~300个的平板为有效计数平板;(5)活孢子的含量为:C=T×N×10,式中:C是真菌农药活孢子含量,单位为CFU/g;T是统计平板对应的稀释倍数;N是同一稀释倍数的多个有效计数平板上的平均菌落数。本发明可以简便快速测定真菌微生物农药的活孢子含量,检测准确度高。
申请公布号 CN102899386B 申请公布日期 2014.06.11
申请号 CN201210434841.4 申请日期 2012.11.05
申请人 农业部农药检定所 发明人 袁善奎;姜辉;崔晓岚;王一喆;林荣华;瞿唯钢;胡承勇;曲甍甍;周艳明
分类号 C12Q1/06(2006.01)I 主分类号 C12Q1/06(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种快速测定真菌微生物农药中活孢子含量的方法,包括下列步骤:(1)在真菌培养基中加入以重量计0.25‰~5‰的脱氧胆酸钠,并制备成平板;所述真菌培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,将培养基高压蒸汽灭菌,待冷却到55~62℃时,向培养基中加入脱氧胆酸钠,制备成平板;(2)将真菌微生物农药样品在含重量百分比0.05%~0.1%吐温20或0.05%~0.1%聚乙二醇辛基苯基醚的灭菌水中浸泡20~40min,再振荡20~40min;所述振荡在室温、150rpm的条件下进行;(3)将步骤(2)处理后的样品进行倍数梯度稀释,分别将不同稀释度的样品均匀涂布在步骤(1)获得的平板上,室温下培养48~120h;所述倍数梯度稀释采用10倍数梯度稀释,同一稀释度制作3个重复样品;(4)统计各平板上的菌落数,其中菌落数在30个~300个的平板为有效计数平板;(5)真菌微生物农药中,活孢子的含量为:C=T×N×10,式中:C是真菌农药活孢子含量,单位为CFU/g;T是统计平板对应的稀释倍数;N是同一稀释倍数的多个有效计数平板上的平均菌落数。
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