发明名称 具有免疫保护性的脑多头带绦虫烯醇酶TmENO重组蛋白
摘要 本发明涉及脑多头带绦虫免疫保护性抗原烯醇酶TmENO重组蛋白及其制备方法及应用。本发明的重组蛋白其氨基酸序列是GenBank登录号JQ627651的ORF序列编码的氨基酸序列SEQNo.5,其编码基因序列按大肠杆菌偏爱密码子进行优化后的基因序列为SEQNo.6。重组蛋白能明显减少寄生在绵羊绵羊大脑中的包囊数,说明具有免疫保护性。相关实验表明,本发明的重组蛋白免疫动物后可产生高滴度的抗体,并对脑多头带绦虫虫卵攻击感染产生较强的免疫保护性。本发明的TmENO重组蛋白是脑多头蚴病疫苗研制的候选靶标,可以用于脑多头蚴病的免疫预防。
申请公布号 CN103131719B 申请公布日期 2014.06.04
申请号 CN201310043128.1 申请日期 2013.02.04
申请人 中国农业科学院兰州兽医研究所 发明人 李文卉;付宝权;曲自刚;谢志宙;刘静宜
分类号 C12N15/60(2006.01)I;C12N9/88(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P33/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/60(2006.01)I
代理机构 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 代理人 张晋
主权项 1.一种具有免疫保护性的脑多头带绦虫的重组蛋白的制备方法,其特征在于:在GenBank登陆号为JQ627651的ORF序列的5′端和3′端分别加上酶切位点<i>Nde</i>Ⅰ/ <i>Xho</i>Ⅰ后,然后将其按下表进行密码子优化后人工合成,测序获得基因序列SEQ ID No:6, <img file="2013100431281100001DEST_PATH_IMAGE001.GIF" wi="563" he="303" />接着将合成的SEQ ID No:6的DNA产物与载体pET30a分别用<i>Nde</i>Ⅰ/<i>Xho</i>Ⅰ双酶切进行连接,构建重组表达质粒pET30a-TmENO,再将pET30a-TmENO转化到表达菌BL21(DE3) 中进行诱导表达,收集菌体并进行纯化处理得到所述重组蛋白。
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