一种控制细菌纤维素聚合度的细菌纤维素微生物制备方法

摘要

本发明公开了一种控制细菌纤维素聚合度的细菌纤维素微生物制备方法。本发明以细菌纤维素产生菌--葡糖酸醋酸杆菌(Gluconacetobacter sp.)GD-BC-1CCTCC M 208149作为发酵菌株，通过调整发酵培养基配方、培养方式、发酵时间等方式达到控制细菌纤维素聚合度，使得细菌纤维素平均聚合度在1361～2350范围内，因此可根据实际应用需要制备不同平均聚合度的细菌纤维素。本发明提供了一种有别于物理或化学因素控制细菌纤维素平均聚合度的方法，该控制方法简单，通过调节细菌纤维素平均聚合度以适应各种工业加工的需求，拓宽了细菌纤维素的应用范围。

主权项

一种控制细菌纤维素聚合度的细菌纤维素微生物制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）菌种的液体活化：保藏号为CCTCC M208149的葡糖酸醋酸杆菌(Gluconacetobacter sp.)GD‑BC‑1经固体斜面活化后，再接种于液体活化培养基中，于28‑32℃往复式摇床振荡培养18～36小时，摇床转速为80‑110r/m，冲程为65‑75mm，由此获得液体活化种子液，所述的液体活化培养基为每升含有葡萄糖80～120g，酵母膏8～12g，蛋白胨5～10g，余量为水，pH值6.0～7.0；（b）发酵：将液体活化种子液按照5～10%的接种量，接入发酵培养基中进行动态发酵培养或者静态发酵培养，得到目标细菌纤维素；所述的动态发酵培养为在温度28‑32℃，冲程65‑80mm，转速60‑100r/m的往复式摇床振荡培养6～12天；所述的静态发酵培养为在温度28‑32℃静止放置6‑12天；所述的发酵培养基为以下培养基中的一种：发酵培养基A：每升含有葡萄糖30‑50g，酵母膏0.8‑1.2g，蛋白胨6‑8g，Na₂HPO₄·12H₂O6‑10g，生化级玉米浆4‑8g，乙酸0.8‑1.2g，无水乙醇8‑12g，余量为水，pH值5.8‑6.2；发酵培养基B：每升含有甘油或木糖30‑50g，酵母膏0.8‑1.2g，蛋白胨6‑8g，Na₂HPO₄·12H₂O6‑10g，生化级玉米浆4‑8g，乙酸0.8‑1.2g，无水乙醇8‑12g，余量为水，pH值5.8‑6.2；发酵培养基C：每升含有葡萄糖15‑25g，酵母膏4‑6g，蛋白胨4‑6g，Na₂HPO₄·12H₂O2.5‑3.0g，柠檬酸1.2‑1.8g，余量为水，pH值4.8‑5.2；所述的保藏号为CCTCC M208149的葡糖酸醋酸杆菌(Gluconacetobacter sp.)GD‑BC‑1经固体斜面活化后，再接种于液体活化培养基中为将葡糖酸醋酸杆菌(Gluconacetobacter sp.)GD‑BC‑1CCTCC M208149划线于固体培养基斜面上，28～32℃培养24～48小时，再冷藏于4℃3～5天，然后再按1cm²面积上述斜面上的菌种接种于20ml的液体活化培养基的量接种，所述的固体培养基为：每升含有葡萄糖80～120g，酵母膏8～12g，碳酸钙15～25g，琼脂15～22g，余量为水，pH值6.5～7.2。