用于生成单克隆抗体的方法和试剂

摘要

在一个实施方案中，本发明涉及用于生成特异性结合抗原的单克隆抗体的方法。本发明可以从多克隆抗体群体诸如非特异性多克隆群体或特异性结合抗原的多克隆抗体群体开始。本方法包括获得编码来自动物的多种免疫球蛋白的重链和轻链免疫球蛋白链(或其可变区)的核酸分子；获得特异性结合所选抗原的多克隆免疫球蛋白群体的肽片段的质谱信息；将多克隆免疫球蛋白的肽片段的质谱信息与核酸序列编码的预测氨基酸序列的预测质谱信息相比较和/或关联，并且然后装配重链和轻链以产生特异性结合抗原的抗体(或其可变区)。

主权项

用于获得特异性结合抗原的免疫球蛋白的重链或轻链的核苷酸序列或氨基酸序列的方法，其包括：(a) 提供编码至少一种动物的免疫球蛋白链或其可变区的核酸序列；(b) 获得特异性结合抗原的多克隆免疫球蛋白群体，并且获得所述群体的重链或轻链或其可变区的肽片段的质谱信息；(c) 将所述肽片段的质谱信息与从所述核酸序列预测的质谱信息相关联，以鉴定包含所述肽片段的免疫球蛋白链(或其可变区)的核苷酸序列或氨基酸序列，其中所述预测质谱信息源自所述核酸序列编码的预测氨基酸序列；和(d) 基于所述肽片段对所述免疫球蛋白链或其片段的氨基酸序列覆盖率从鉴定的免疫球蛋白链(或其可变区)的核苷酸序列或氨基酸序列中选择，以获得特异性结合抗原的免疫球蛋白的重链或轻链的核苷酸序列或氨基酸序列。