液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺

摘要

本发明涉及发酵工程技术领域，公开了一种液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺。本发明包括菌种活化、液体菌种培养、液体深层发酵及桦褐孔菌免疫增强活性物质制备等主要步骤。本发明提供一种优化的液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺，获得的免疫增强活性物质含量更高，活性更好，产品更利于工业化应用。

主权项

一种液体深层发酵生产桦褐孔菌免疫增强活性物质的工艺，其特征在于：所述的工艺步骤如下：（1）菌种活化：以桦褐孔菌为菌种，接种至斜面菌种培养基上培养，获得活化菌种；（2）液体菌种培养：将活化菌种转入液体种子培养基中，摇床培养至对数期得液体菌种；（3）液体深层发酵：将液体菌种接入液体深层发酵培养基中发酵培养，液体菌种与液体深层发酵培养基的体积比为1:8‑10，所述液体深层发酵培养基的配方为：葡萄糖30‑32g/L，木质纤维素32‑38g/L，促进剂0.9‑1g/L，诱导剂3×10^‑5 g/L，蛋白胨 3g/L，KH₂PO₄ 1g/L，ZnSO₄·2H₂O 0.01g/L， K₂HPO₄  0.4g/L，FeSO₄·7H₂O  0.05 g/L， MgSO₄·7H₂O  0.5 g/L，CuSO₄·5H₂O  0.02 g/L，CoCl₂ 0.01 g/L，MnSO₄·H₂O 0.08 g/L，pH值6.0；所述促进剂为油酸、甲醇或Tween‑80；所述诱导剂为苯并噻二唑或茉莉酸甲酯；所述木质纤维素选自花生壳、甘蔗渣中的一种；液体深层发酵的工艺参数为：发酵温度27‑28℃，发酵罐空气流量0.5‑1.0vvm，发酵罐内部压力0.1‑0.25 kg/cm³，搅拌转速70‑150转/分钟，发酵周期12‑14天；（4）桦褐孔菌免疫增强活性物质制备：将发酵产物过滤，获得菌丝体和发酵液，将菌丝体超声波破壁，干燥粉碎后得菌丝体粉，将发酵液浓缩至原体积的30%‑40%后得发酵浓缩液，按1g菌丝体粉加30‑40ml发酵浓缩液的比例，将菌丝体粉和发酵浓缩液混合均匀，干燥后得粉状的桦褐孔菌免疫增强活性物质。