一种溶解包涵体蛋白的方法

摘要

本发明一种溶解包涵体蛋白的方法，将表达包涵体蛋白的菌体离心收集，离心菌体用PBS重悬，加入溶菌酶室温1-3小时后经超生破碎，然后离心弃掉上清得到包涵体蛋白沉淀；将所述的包涵体蛋白沉淀重悬于IBbuffer中，然后离心，弃掉上清，重复1-6次洗涤包涵体蛋白；用含有尿素的PBS重悬洗涤后的包涵体蛋白；然后将包涵体蛋白悬液冷冻；将冷冻的包涵体蛋白悬液置于室温，缓慢溶解，然后离心，上清即为可溶的包涵体蛋白。本发明的方法操作简单，得到的包涵体蛋白溶液含有较低浓度的变性剂，简化了复性步骤，节约了时间，提高了蛋白复性效率。

主权项

一种溶解包涵体蛋白的方法，其特征在于：包括一个收集包涵体蛋白的步骤、一个洗涤包涵体蛋白的步骤、一个将包涵体蛋白重悬于含有尿素的PBS溶液的步骤、一个冷冻包涵体蛋白的步骤和一个室温溶解包涵体蛋白的步骤；在所述的收集包涵体蛋白的步骤中，将表达包涵体蛋白的菌体离心收集，离心菌体用PBS 重悬，加入溶菌酶室温1‑3小时后经超生破碎，然后离心弃掉上清得到包涵体蛋白沉淀；在所述的洗涤包涵体蛋白的步骤中，将所述的包涵体蛋白沉淀重悬于IB buffer中，然后离心，弃掉上清，重复1‑6次洗涤包涵体蛋白；在所述的将包涵体蛋白重悬于含有尿素的PBS溶液的步骤中，用含有尿素的PBS重悬洗涤后的包涵体蛋白；在所述的冷冻包涵体蛋白的步骤中，将包涵体蛋白悬液冷冻；在所述的室温溶解包涵体蛋白的步骤中，将冷冻的包涵体蛋白悬液置于室温，缓慢溶解，然后离心，上清即为可溶的包涵体蛋白。