特异性IgE抗体的检测方法、该方法所使用的试剂盒以及该试剂盒的制备和使用方法

摘要

本发明提供一种特异性IgE抗体的检测方法、该方法所使用的试剂盒以及该试剂盒的制备和使用方法，该特异性IgE检测方法采用捕获法-酶联免疫检测模式，用抗人-IgE抗体包被酶标反应板，生物素标记的抗原，根据需要任意选择生物素化抗原，如待检血清中存在相应的sIgE，此sIgE将同时与微孔板上包被的抗人IgE抗体和液相中的生物素标记抗原结合，再用酶标记的链霉亲和素溶液与生物素结合，通过加入显示底物，通过测定吸光度后来确认过敏原种类。试剂盒中至少包括包被有抗人IgE抗体的酶标板和多种生物素化已知过敏原。本发明的有益效果是该IgE检测方法便于检测人员根据需要灵活选择过敏原项目组合，提高了检测试剂的通用性和利用率，简化试剂盒的制备工艺。

主权项

特异性IgE抗体的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）用抗人‑IgE抗体包被酶标反应板；（2）将已知抗原标记生物素分子，形成生物素标记的抗原；（3）在检测sIgE时，根据患者病史确定疑似食物过敏原种类和需要检测孔的数量；根据选定的过敏原选择对应的生物素化抗原，每种生物素化抗原分别加入酶标反应板上的不同检测孔中，检测孔再中分别加入待检血清样本；如样本中存在与生物素标记的抗原对应的sIgE，此待检sIgE将同时与该对应的生物素化抗原和酶标反应板表面包被的抗人IgE抗体结合；（4）洗涤去除检测孔中未结合的生物素标记抗原，再加入酶标记的链霉亲和素溶液，使之与生物素结合，如果待检样本中存在与生物素标记的抗原对应的sIgE，检测板表面将形成抗人IgE‑待检sIgE‑已知生物素标记抗原‑链霉亲和素‑酶复合物；（5）最后加入显色底物，终止催化反应后用酶标仪读取吸光度值，即可确定过敏原种类。