| 主权项 |
提取楠木RNA的方法，其特征在于包括如下步骤： a、按重量份取0.1份楠木叶片，磨成粉，然后加入到0.8～1.5份的预处理液中，再加入0.1～0.3份的乙酸乙酯，混匀，得到匀浆液；其中，所述的预处理液为：可溶性聚乙烯吡咯烷酮、乙二胺四乙酸、β‑巯基乙醇的混合溶液，可溶性聚乙烯吡咯烷酮的浓度为2～4wt%，乙二胺四乙酸的浓度为80～120mmolL<sup>‑1</sup>，β‑巯基乙醇的浓度为1.5～2.5%v/v； b、匀浆液静置1～3分钟；离心，溶液分为三层，弃去上面两层，保留下层的沉淀； c、b步骤所得沉淀加入裂解剂裂解；所述的裂解剂为Tris‑SDS裂解液，其组成为：100mmol/L Tris‑HCl，400mmol/L氯化钠，1.0%SDS，2%β‑巯基乙醇，pH=7.5； d、裂解后的溶液除去多糖杂质；所述除去多糖杂质的方法为：加入高盐溶液和酸酚/二氯甲烷溶液，混匀，离心，弃沉淀，所得上清液进入萃取步骤；所述的高盐溶液为1.0～1.4mol/L氯化钠和0.6～1.0mol/L柠檬酸钠的混合溶液；所述的酸酚/二氯甲烷溶液为酸酚和二氯甲烷按体积比1:1的混合溶液，并用醋酸钠调节pH值至3.7；高盐溶液和酸酚/二氯甲烷溶液的体积比为1.6～2.4:2.5～3.5； e、萃取、离心，所得上清液用异丙醇沉淀，所得沉淀用70～80wt%的乙醇溶液洗涤，得到楠木RNA。 |
