一种重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法

摘要

本发明公开了重组脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法。本发明所提供的方法包括如下步骤：1）将脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因和3ABC基因克隆到目的质粒中，得到重组表达载体；2）用所述重组表达载体转化目的酵母细胞，得到表达所述P1基因和所述3ABC基因的重组酵母细胞；3）裂解所述重组酵母细胞，分离得到重组的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒。实验证明，利用本发明所提供方法，在酵母表达系统中制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒，同时较野生型P1基因和3ABC基因相比，本发明对P1基因和3ABC基因的密码子优化大大提高了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的病毒样颗粒在酵母表达系统中的产量，可将其进一步用于生产婴幼儿手足口病候选预防性疫苗和药物组合物。

主权项

脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒的制备方法，包括如下步骤：1）将脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因和脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的3ABC基因克隆到目的质粒中，得到重组表达载体；2）用步骤1）得到的重组表达载体转化目的酵母细胞，得到表达所述P1基因和所述3ABC基因的重组酵母细胞；3）裂解步骤2）得到的重组酵母细胞，分离得到重组的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型病毒样颗粒；所述脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的P1基因的核苷酸序列为序列表中序列1所示；所述脊髓灰质炎病毒Ⅰ型的3ABC基因的核苷酸序列为序列表中序列2所示。所述目的酵母细胞为酿酒酵母INVSC1；所述重组表达载体为将所述P1基因和所述3ABC基因分别插入到pESC‑URA的两个多克隆位点处各由一个启动子驱动转录得到的重组质粒。