一种用液相色谱法测定恩替卡韦片中有关物质的方法

摘要

本发明涉及一种用液相色谱法分离测定恩替卡韦片有关物质的方法,该方法以十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以磷酸二氢钾溶液（pH=3.0）-甲醇为流动相,磷酸二氢钾溶液-甲醇溶液体积比为95:5,可以测定恩替卡韦片的有关物质含量,从而有效控制药品质量。

主权项

1.一种测定恩替卡韦片中有关物质的方法，其特征在于，包括下列步骤：（1）盐酸溶液制备步骤量取1.0mL盐酸至1000mL水中，混匀制得盐酸溶液；（2）供试品溶液制备步骤取恩替卡韦片研成细粉，精密称取细粉适量，将细粉完全转移至量瓶中，加步骤（1）制备的盐酸溶液使溶解并定容，滤过，取续滤液制成每1mL约含恩替卡韦0.04ug的溶液，作为供试品溶液；（3）对照品溶液制备步骤从步骤（2）制备的供试品溶液中精密量取1mL到100mL容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀作为自身的重量百分比浓度为1.0%的对照品溶液；（4）流动相制备步骤流动相为0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（pH=3.0）：甲醇=95:5；（5）色谱系统建立步骤以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱，色谱柱：C18250*4.6mm,柱温：30℃，检测器：紫外检测器,250nm，流速：1.0ml/min，进样体积：50μl；（6）梯度洗度步骤等度洗脱；（7）分析过程步骤精密量取50μl的空白溶液，步骤（2）制备的供试品溶液和步骤（3）制备的对照溶液注入液相色谱仪，依照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定，记录色谱图；（8）计算步骤步骤（7）得到生物供试品溶液色谱图中如出现杂质色谱峰，记录各杂质的峰面积，用主成分自身对照法计算杂质含量，计算公式如下：$\%\mathrm{impurityA}=\frac{A_{\mathrm{spl}}}{A_{\mathrm{std}}}$注：A_spl=样品溶液中杂质峰面积;A_std=1.0%自身对照溶液主峰峰面积。