发明名称 |
一种水产品中腐败希瓦氏菌的分离和检测方法 |
摘要 |
本发明涉及一种检测水产品中腐败希瓦氏菌(<i>Shewanellaputrefaciens</i>)检测方法,属于生物技术领域。一种水产品中腐败希瓦氏菌的分离和检测方法,包括如下步骤:a、腐败希瓦氏菌的分离:无菌取鲜活水产样品10g,加入无菌蛋白胨生理盐水制成溶液,稀释后涂布于大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)上进行培养,挑取菌落,分别划线到铁琼脂平板上继续培养,挑取黑色的菌落,收集细菌,抽提DNA;b、PCR分离鉴定:提取待测的产硫化氢细菌的基因组DNA,进行PCR扩增。该检测方法从分离、纯化到PCR扩增等步骤进行了优化,检测结果特异性强,灵敏度高,达10-100CFU/mL,可以对水产品中腐败希瓦氏菌进行快速分离、鉴定和分析。 |
申请公布号 |
CN103820544A |
申请公布日期 |
2014.05.28 |
申请号 |
CN201410041477.4 |
申请日期 |
2014.01.28 |
申请人 |
浙江工商大学 |
发明人 |
朱军莉;冯立芳;赵二科 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N1/20(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
杭州斯可睿专利事务所有限公司 33241 |
代理人 |
林君勇 |
主权项 |
一种检测腐败希瓦氏菌的引物对,其特征在于其是由具有如下所述的核苷酸序列的引物组成:第一引物对为一条引物的序列为F‑CAGTTGGGCCTTTGATGCTT,记为SEQ ID NO.1,另一条的序列为 R‑CACAGAGGTCCCTTCATCGA ,记为SEQ ID NO.2;或者是第二引物对为一条引物的序列为F‑TCAGGATAAAACATTACCATTGGA,记为SEQ ID NO.3,另一条的序列为R‑CCAGGAAAATCTTGGTGGAA ,记为SEQ ID NO.4。 |
地址 |
310035 浙江省杭州市教工路149号浙江工商大学食品与生物工程学院 |