发明名称 |
一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法 |
摘要 |
本发明涉及一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法。其内容包括:1)向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mMTris-HCl,pH8.0,剧烈搅动,25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3-4小时,使沉淀缓慢溶解;2)4℃,12000rpm离心12min,弃沉淀;3)在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液,以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20-22小时,然后用PEG-20000浓缩得可溶性蛋白。利用本发明,WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的复性效率均达到了95%以上,获得了可溶性蛋白。 |
申请公布号 |
CN102924580B |
申请公布日期 |
2014.05.28 |
申请号 |
CN201210468427.5 |
申请日期 |
2012.11.19 |
申请人 |
南京师范大学 |
发明人 |
李鹏;严洁;马晓燕;周开亚 |
分类号 |
C07K14/01(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
主分类号 |
C07K14/01(2006.01)I |
代理机构 |
南京知识律师事务所 32207 |
代理人 |
卢亚丽 |
主权项 |
一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法,其特征是包括以下步骤:1)向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mM Tris‑HCl,pH8.0,剧烈搅动,25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3‑4小时,使沉淀缓慢溶解;所述WSSV囊膜蛋白选自VP466蛋白和VP32蛋白;2)4℃,12000rpm离心12min,弃沉淀;3)在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液,以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20‑22小时,然后用PEG‑20000浓缩得可溶性蛋白。 |
地址 |
210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 |