发明名称 一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法
摘要 本发明涉及一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法。其内容包括:1)向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mMTris-HCl,pH8.0,剧烈搅动,25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3-4小时,使沉淀缓慢溶解;2)4℃,12000rpm离心12min,弃沉淀;3)在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液,以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20-22小时,然后用PEG-20000浓缩得可溶性蛋白。利用本发明,WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的复性效率均达到了95%以上,获得了可溶性蛋白。
申请公布号 CN102924580B 申请公布日期 2014.05.28
申请号 CN201210468427.5 申请日期 2012.11.19
申请人 南京师范大学 发明人 李鹏;严洁;马晓燕;周开亚
分类号 C07K14/01(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I 主分类号 C07K14/01(2006.01)I
代理机构 南京知识律师事务所 32207 代理人 卢亚丽
主权项 一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法,其特征是包括以下步骤:1)向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mM Tris‑HCl,pH8.0,剧烈搅动,25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3‑4小时,使沉淀缓慢溶解;所述WSSV囊膜蛋白选自VP466蛋白和VP32蛋白;2)4℃,12000rpm离心12min,弃沉淀;3)在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液,以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20‑22小时,然后用PEG‑20000浓缩得可溶性蛋白。
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