一种金鸡纳树皮中主要生物碱含量测定的HPLC方法

摘要

本发明公开了一种金鸡纳树皮中主要生物碱含量检测的高效液相色谱方法，流动相：乙腈—磷酸缓冲盐溶液（pH=3.5）；流速：1.0ml/min；色谱柱：C₁₈（4.6×250mm5μm）；柱温：25℃；进样量：10μl；紫外检测器；检测波长：250nm。采用本发明的高效液相方法检测金鸡纳树皮中主要成分含量，具有样品分析时间短；检测成本低；准确性和精确性高；检测有效范围广等优点。

主权项

一种金鸡纳树皮中主要生物碱含量测定的HPLC方法：其特征在于以工业甲醇作为溶剂，从金鸡纳树皮中提取主要生物碱成分，分别制备奎宁对照品溶液、奎尼丁对照品溶液、辛可宁对照品溶液、辛可尼丁对照品溶液和制备金鸡纳树皮提取物供试品溶液；利用HPLC法在250nm波长下同时检测金鸡纳树皮提取物中奎宁、奎尼丁、辛可宁和辛可尼丁的含量；色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充物，以乙腈为流动相A，磷酸缓冲盐溶液（pH=3.5）为流动相B，梯度洗脱程序为：时间0→5min→20min→40min→55min；溶液A：45%→45%→20%→10%→45%；溶液B：55%→55%→80%→90%→55%；柱温25℃~40℃；流速0.8~1.5ml/min；检测波长为250nm，进样量10µl；理论塔板数按奎宁峰计算不得低于3000；对照品溶液的制备：分别取奎宁对照品、奎尼丁对照品、辛可宁对照品和辛可尼丁对照品适量，精密称定，加甲醇适量，分别配置成浓度为10、5、1、0.5mg/ml的对照品溶液；供试品溶液的制备：取金鸡纳树皮约10g，粉碎过60目筛，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，3%强碱浸泡，超声破碎细胞，精密量取95%工业甲醇50ml，密塞，称重，摇匀，超声波提取30~40min，放冷，滤过，收集滤液，同法操作2次，合并滤液，置100ml容量瓶中，再用95%工业甲醇定容，摇匀，微孔滤膜（0.45µm）滤过，即得；测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，测定，即得。