一种间充质干细胞分泌素的制备方法

摘要

本发明提供一种能大量生产，且生产成本低、产品纯度高的间充质干细胞分泌素的制备方法，利用了生物反应器技术替代传统的细胞培养瓶去制作间充质干细胞分泌素,大幅缩减成本及所需空间；且使用的间充质干细胞兼容性高，能安全地持续刺激间充质干细胞细胞分泌蛋白，提高了充质干细胞细胞分泌素的产量。

主权项

一种间充质干细胞分泌素的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：a.培养得到间充质干细胞，并将间充质干细胞注入到含有细胞培养液和微载体的生物反应器中，生物反应器中的间充质干细胞不少于1千万个每升；在生物反应器中对间充质干细胞进行培养，以磷酸盐缓冲液对生物反应器中的间充质干细胞和微载体进行清洗；所述间充质干细胞为脂肪间充质干细胞、牙髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞或牙龈间充质干细胞；b.向生物反应器中注入细胞培养基底液和磷酸盐缓冲液继续培养，细胞培养基底液为DMEM细胞培养基底液，所述DMEM细胞培养基底液与所述磷酸盐缓冲液的体积比为1/5至1/2；c.收集生物反应器中的上清液，并将所述上清液浓缩得到蛋白质浓缩液；d.以纯水稀释所述蛋白浓缩液，置于生物反应器中，重复步骤b、c，得到的蛋白浓缩液中的蛋白即为间充质干细胞分泌素。