一种噬菌体展示随机肽库的构建方法

摘要

一种噬菌体展示随机肽库的构建方法，所述方法采用NNK编码方式，将编码随机肽库的两条链经退火、延伸补平、双酶切后，与经同样双酶切的5’去磷酸化载体连接，电转TG1感受态细胞。扩增菌液后进行库容和多样性检验。利用该肽库筛选获得的肽段序列，通过测序分析即可得到与药物特异性结合的外源蛋白或多肽。该技术广泛应用于抗原表位的模拟和蛋白、核酸结合特性的研究，同时在药物筛选和疫苗研制方面也有广泛的应用。

主权项

一种噬菌体展示随机肽库的构建方法，包括：(1)采用NNK编码方式，其中N代表任意核苷酸，K代表G或T，可指导合成全部20种氨基酸。将编码随机肽库的两条链经退火、延伸后进行双酶切；(2)将载体经与(1)同样的双酶切后，进行5’去磷酸化；(3)将(1)获得的随机序列与(2)获得的脱磷酸载体进行连接，电转TG1感受态细胞构建随机肽库；(4)取扩增后的TG1肽库菌液，梯度稀释后涂布SOB平板，计算库容。随机挑取克隆进行测序，对其多样性进行检验。