游离细胞催化固定化对苯二酚合成α-熊果苷的方法

摘要

本发明涉及利用大孔吸附树脂固定化对苯二酚，通过野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris）CGMCC NO.1243游离细胞催化固定化对苯二酚与双糖合成α-熊果苷的制备方法。它包括固定化对苯二酚的制备，黄单胞菌游离细胞的制备，反应条件优化，游离细胞和树脂的回收及循环使用和产物分离提取等工艺步骤。采用本发明生产α-熊果苷，对苯二酚转化率达到90.5-95.2%，每升反应液α-熊果苷产量为20-250g，比直接用游离对苯二酚作为反应物的产量提高了2-15倍。此外，菌体细胞的使用寿命长达5-10个周期，树脂使用寿命达50-300个周期；产物经分离纯化后纯度可达99.5％以上。本发明利用游离细胞催化固定化对苯二酚，具有产量高、工艺简单、环境友好等优点，大大降低了α-熊果苷生产成本。

主权项

游离细胞催化固定化对苯二酚合成α‑熊果苷的方法,其特征在于:用大孔吸附树脂对对苯二酚进行固定化，然后用野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris）CGMCC NO.1243游离细胞在缓冲溶液系统中催化固定化对苯二酚与双糖合成α‑熊果苷，该方法由下列工艺步骤组成：（1）固定化对苯二酚的制备；（2）野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris）CGMCC NO.1243游离细胞的制备，其中包括种子培养和发酵罐培养；（3）加入固定化对苯二酚和双糖进行合成反应；（4）游离细胞和大孔吸附树脂的回收及循环使用；（5）α‑熊果苷的分离纯化。