发明名称 |
一种带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆及构建方法和应用 |
摘要 |
本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆及构建方法和应用。以低拷贝质粒pACYC177为载体,首先插入CA16/GD09/24病毒株的全长cDNA;然后以此全长感染性克隆为骨架,在5’UTR和VP4间插入eGFP报告基因并添加2A蛋白酶切割位点(AITTL),从而获得带有eGFP报告基因的CA16全长感染性克隆。本发明所构建的带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆可以拯救出具有与重组CA16病毒及亲本CA16生长趋势相似的eGFP-CA16报告病毒,并可以用于抗病毒药物筛选,为深入开展病毒复制与致病机理研究提供了便捷的平台,为今后筛选和开发新型疫苗奠定了坚实的基础。 |
申请公布号 |
CN103805634A |
申请公布日期 |
2014.05.21 |
申请号 |
CN201410077204.5 |
申请日期 |
2014.03.05 |
申请人 |
中国科学院武汉病毒研究所 |
发明人 |
张波;邓成林;徐琳琳;秦成峰;李晓丹;袁志明;叶寒青 |
分类号 |
C12N15/85(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/85(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种带有绿色荧光蛋白基因的CA16感染性克隆pACYC177‑eGFP‑CA16‑FL,其序列为SEQ ID NO.1所示。 |
地址 |
430071 湖北省武汉市武昌区小洪山中区44号 |