一种雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法

摘要

本发明涉及一种雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法。将合成的Fe₃O₄纳米颗粒加入液体石蜡油中，与羧甲基壳聚糖溶液混合，加入交联剂，采用磁分离收集纳米微球，经洗涤、干燥得到磁性羧甲基壳聚糖纳米微球；将制得的磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液，雷帕霉素溶于乙腈，搅拌，将二者混合；采用磁分离，下层沉淀用超纯水洗涤，经冷冻干燥、粉碎得到雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球。本发明制备的纳米载药微球具有靶向性强、载药量高、缓释性能好、粒径小、药物毒副作用低等特点，能显著提高雷帕霉素药物对肿瘤细胞的杀伤率；该方法工艺简单，制备条件温和，易于规模化生产。

主权项

一种雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法，包括磁性Fe3O4纳米颗粒的制作，磁性羧甲基壳聚糖纳米微球的制作；所述磁性Fe3O4纳米颗粒制作步骤如下：A、将七水硫酸亚铁水溶液和PEG‑20000水溶液混合，不断搅拌下加一定浓度的稀氨水至pH值为9.5~10.5，溶液呈现墨绿色；B、逐步加入双氧水溶液，使得溶液由墨绿色变为黑色；C、收集溶液并转移至高压反应釜，于160℃下恒温5h；D、采用磁分离，收集下层沉淀；先后用蒸馏水和无水乙醇洗涤，然后采用真空干燥10~20小时，干燥完成后研磨得到磁性Fe3O4纳米颗粒；所述磁性羧甲基壳聚糖纳米微球制备步骤如下：a. 将磁性Fe3O4纳米颗粒加到油相，搅拌分散均匀；b. 将配好的羧甲基壳聚糖溶液作为水相缓慢加到油相中，搅拌混合均匀，得到混合液；c. 向混合液中加入交联剂并继续搅拌反应一段时间；d. 磁分离收集下层沉淀，先后用石油醚、丙酮洗涤，干燥得到磁性羧甲基壳聚糖纳米微球；其特征在于：还包括如下步骤：未注明的用量和比例以质量计 （1）将制得的磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液作为水相，雷帕霉素溶于乙腈液作为有机相；所述的磁性羧甲基壳聚糖纳米微球的用量为雷帕霉素用量的8~12倍，，磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度为0.5%~1.0%；（2）将有机相缓慢地加入水相中，所述的水相体积用量是有机相体积用量的10~20倍；进行搅拌，其转速为600rpm~1500rpm，时间为10~20h；（3）先用超纯水洗涤，然后用磁分离收集所得微球；重复超纯水洗涤、磁分离步骤3‑5次；（4）将所得微球经冷冻干燥，所述冷冻干燥时间为10~15h；粉碎，得到雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球，所述雷帕霉素/磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的粒径为30±2nm。