利用乙醇双水相法提取紫菜藻胆蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种利用乙醇双水相法提取紫菜藻胆蛋白的方法，依次包括以下步骤：(1)将干紫菜粉碎后加蒸馏水浸泡；(2)利用胶体磨处理浆状紫菜悬浮液，分离，分别得上清液I和沉淀；(3)所得沉淀加水经超声波提取分离，得上清液II；(4)将上清液I和上清液II合并后加入硫酸铵，静置后离心；(5)所得的上清液III中加入硫酸铵和乙醇，静置，取中间相；将步骤(5)所得的紫菜藻胆蛋白沉淀经洗涤、干燥和粉碎；得到紫菜藻胆蛋白。采用方法该提取紫菜藻胆蛋白，具有工艺简洁、得率高等特点。

主权项

利用乙醇双水相法提取紫菜藻胆蛋白的方法，其特征是依次包括以下步骤：（1）、干紫菜粉碎和浸泡：将干紫菜粉碎后按固液比1g/12～17ml添加蒸馏水，浸泡20～50min；得浆状紫菜悬浮液；（2）、湿紫菜的机械破碎提取分离：将胶体磨磨盘间隙调整至4～10μm，处理浆状紫菜悬浮液30～120s，所得的汁液离心，分别得上清液Ⅰ和沉淀；（3）、沉淀加水，经超声波提取分离：在步骤（2）所得的沉淀中加入蒸馏水，所述蒸馏水与步骤（1）中的干紫菜的料液比为1～3ml/2g；搅拌均匀后，经300～800W超声波处理20～60min，离心，得上清液Ⅱ；（4）、低浓度硫酸铵处理：将上清液Ⅰ和上清液Ⅱ合并后所得的合并液中加入粉末状的硫酸铵，于3～5℃静置20～50min，离心，得上清液Ⅲ；所述每L合并液中加入25～90g的硫酸铵；（5）、乙醇双水相分离紫菜藻胆蛋白：在所述上清液Ⅲ中加入硫酸铵，得紫菜藻胆蛋白溶液；所述每L紫菜藻胆蛋白溶液中含有硫酸铵170～250g；在所述紫菜藻胆蛋白溶液中添加乙醇，所述紫菜藻胆蛋白溶液与乙醇的体积比为2～1:1；于3～5℃静置1～5h后，出现清晰的分层；取中间相，离心；得紫菜藻胆蛋白沉淀；（6）、洗涤：将步骤（5）所得的紫菜藻胆蛋白沉淀用蒸馏水以0.45μm微孔滤膜抽滤洗涤2～4次；（7）干燥、粉碎：将步骤（6）所得的洗涤后的紫菜藻胆蛋白沉淀经真空冷冻干燥、粉碎，得到紫菜藻胆蛋白。