发明名称 |
一种氧化葡萄糖酸杆菌无抗性标记基因敲除体系 |
摘要 |
本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌无抗性标记基因敲除体系,属于基因工程技术领域。本发明通过同源重组技术,将G.oxydans中upp基因进行敲除,得到一upp基因缺陷型菌株;同时构建了含有一个能在G.oxydans中良好转录表达并具有条件致死功能的upp基因、一个用于G.oxydans转化子选择的抗性标记卡那霉素标记抗性基因及一个MCS多克隆位点的重组整合质粒。该质粒适用于G.oxydans染色体基因敲除和替代,相比使用抗性标记基因作为筛选标记进行基因敲除有以下两点优势:不将抗性基因引入G.oxydans基因组中,避免了抗性基因对上下游基因产生极性作用;利用该敲除体系可以在同一菌株中进行多次染色体基因敲除和替代。 |
申请公布号 |
CN103805545A |
申请公布日期 |
2014.05.21 |
申请号 |
CN201410055749.6 |
申请日期 |
2014.02.19 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
陈坚;周景文;夏雨;堵国成 |
分类号 |
C12N1/20(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I |
主分类号 |
C12N1/20(2006.01)I |
代理机构 |
北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 |
代理人 |
何自刚;王玉松 |
主权项 |
一种氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)无抗性标记基因敲除体系,其特征在于包括一株upp基因缺陷型G.oxydans和一个携带了upp基因、抗生素抗性标记和多克隆位点的重组整合质粒。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |