一种鉴定番茄灰霉病菌对苯酰菌胺抗药性的分子检测方法

摘要

本发明涉及灰霉病菌（Botrytis cinerea）β-微管蛋白基因的克隆及其在苯酰菌胺（zoxamide）抗性监测中的应用，具体公开了一种快速鉴定灰霉病菌抗药性的分子检测方法及专用引物。属于分子生物技术领域。该特异性引物对SEQ ID NO:2（或SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3）和SEQ ID NO:5所示的DNA分子组成。本发明提供的检测灰霉病菌对苯酰菌胺产生抗药性的点突变的方法，具有高灵敏度、简单快速、稳定性好的特点，可以快速、灵敏地检测田间灰霉病菌对苯酰菌胺的抗性发生发展动态，及时调整病害防治策略，以延缓和控制抗药性的进一步发展。

主权项

一种检测或辅助检测灰霉病菌(Botrytis cinerea)中β‑微管蛋白基因是否存在突变位点的方法，包括如下步骤： 以待测灰霉病菌的基因组DNA为模板，采用SEQ ID NO:2（或SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3）和SEQ ID NO:5所示引物对进行PCR扩增，若PCR扩增产物为365bp的片段，则所述待测灰霉病菌中β‑微管蛋白基因存在或候选存在突变位点；所述PCR扩增中，退火温度为50‑56.7℃ 所述突变位点指灰霉病菌中β‑微管蛋白的基因组序列自5’末端起第876位核苷酸为A。