发明名称 |
肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部融合蛋白改构体快速筛选方法及其应用 |
摘要 |
本发明改构了可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-“脂联素”球部重组融合蛋白的基因序列,去除了肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部基因间的冗余序列,共去除18个氨基酸,形成了只含有可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部的新的基因;并合成了改造后的基因在哺乳动物细胞中表达的偏爱密码子。经过比较,改构后的基因表达的蛋白更加稳定,优化的密码子在哺乳动物细胞中表达效率提高约4-6倍。本发明还建立了一种快速大量获得蛋白的腺病毒/BHK21表达系统,该表达系统的生产规模易于放大,适应无血清培养,可以反复多次收获目标蛋白,成功制备了有生物学活性的改造后的融合蛋白。 |
申请公布号 |
CN102690353B |
申请公布日期 |
2014.05.14 |
申请号 |
CN201110073658.1 |
申请日期 |
2011.03.25 |
申请人 |
温州医学院;北京五加和分子医学研究所有限公司 |
发明人 |
高基民;董小岩;刘丹;陆月;吴小兵 |
分类号 |
C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;A61K38/19(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P19/02(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I |
主分类号 |
C07K19/00(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种经改构的肿瘤坏死因子受体II‑脂联素球部的融合蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。 |
地址 |
325035 浙江省温州市茶山高教园区温州医学院 |