发明名称 肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部融合蛋白改构体快速筛选方法及其应用
摘要 本发明改构了可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-“脂联素”球部重组融合蛋白的基因序列,去除了肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部基因间的冗余序列,共去除18个氨基酸,形成了只含有可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部的新的基因;并合成了改造后的基因在哺乳动物细胞中表达的偏爱密码子。经过比较,改构后的基因表达的蛋白更加稳定,优化的密码子在哺乳动物细胞中表达效率提高约4-6倍。本发明还建立了一种快速大量获得蛋白的腺病毒/BHK21表达系统,该表达系统的生产规模易于放大,适应无血清培养,可以反复多次收获目标蛋白,成功制备了有生物学活性的改造后的融合蛋白。
申请公布号 CN102690353B 申请公布日期 2014.05.14
申请号 CN201110073658.1 申请日期 2011.03.25
申请人 温州医学院;北京五加和分子医学研究所有限公司 发明人 高基民;董小岩;刘丹;陆月;吴小兵
分类号 C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;A61K38/19(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P19/02(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I 主分类号 C07K19/00(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种经改构的肿瘤坏死因子受体II‑脂联素球部的融合蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
地址 325035 浙江省温州市茶山高教园区温州医学院