一种基于分子印迹吸附技术的埃博霉素B分离提取方法

摘要

一种基于分子印迹吸附技术的埃博霉素B分离提取方法，采用大孔树脂对发酵液进行吸附，然后用乙酸乙酯浸提吸附后的大孔树脂，用超滤膜过滤浸提液，得粗提物；向粗提物中加入埃博霉素B分子印迹聚合物来特异性吸附埃博霉素B，在摇床上震荡后离心并收集下层沉淀物，再用甲醇对沉淀物进行多次洗脱，收集洗脱液；再结晶得埃博霉素B。本发明具有操作简便，选择性好，低污染等特点。本发明中操作步骤简单易行，分离步骤少，成本低廉，产率较高，避免了埃博霉素B在其它复杂制备流程中的损失，更重要的是便于工业化大生产，具有十分广阔的应用前景和经济效益。

主权项

一种基于分子印迹吸附技术的埃博霉素B分离提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）树脂对发酵液进行吸附：将纤维堆囊菌在液体培养基中进行发酵，并向液体培养基中加入经过处理的大孔树脂，发酵120～150h后过滤得到吸附树脂；其中，大孔树脂的加入量为液体培养基体积的2‑5%；（2）乙酸乙酯浸提：用乙酸乙酯浸提吸附树脂，收集浸提液；（3）用超滤膜过滤浸提液：将浸提液采用截留分子量为1000～5000的超滤膜过滤以去除大分子杂质，得粗提物；（4）添加分子印迹聚合物：向粗提物中加入埃博霉素B分子印迹聚合物来特异性吸附埃博霉素B，在摇床上震荡后离心并收集下层沉淀物，再用甲醇对沉淀物进行多次洗脱，收集洗脱液；其中，埃博霉素B分子印迹聚合物的加入量为粗提物体积的5～10%；（5）结晶：将洗脱液进行真空浓缩，得浅黄色浓缩液；将浓缩液于‑20～‑10℃下进行低温结晶，得到白色粉末状结晶，即为埃博霉素B。