PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法

摘要

本发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据单增李斯特菌hly基因设计扩增引物和测序引物，建立了PCR-焦磷酸测序，从DNA碱基序列水平上检测单增李斯特菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增，保证扩增片段的特异性，再用扩增产物制备单链模板，在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列，用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现，单增李斯特菌hly基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性，测序引物后21个DNA碱基序列为ATCCAGGTGC TCTCGTAAAA G时就可鉴定为单增李斯特菌。

主权项

一组PCR‑焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物，其特征在于，包括PCR引物和测序引物：PCR引物：上游引物F：AGTATACCACGGAGATGCAGTGA；         下游引物R：GGCAAATCAATGCTGAGTGTT；测序引物S：AATTTCGAGCCTAACCT。