一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法

摘要

本发明公开了一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法，包括以下步骤：清洗并去除牛睾丸内外皮层，绞碎成糜浆；加入等体积的水，调节pH值至8.0～9.0，按照每1kg糜浆加入5～10mL盐解液的比例，加盐解液搅拌，4～8℃保温2～4小时，过滤取上清液；按每1L过滤液加400g硫酸铵的比例，加入硫酸铵搅拌溶解，静置24小时，过滤，将所得玻璃酸酶粗品溶于水中，调pH值为4.0～7.0，在磷酸盐-柠檬酸缓冲液中透析24小时；除热原；过滤取上清液调节pH值6.5～7.0，冷冻干燥得玻璃酸酶精品。采用盐解的方法能够提高产品效价，生产工序的每一步滤液均能得到回收利用，适用于工业生产。

主权项

一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、原料处理；清洗并去除牛睾丸内外皮层，绞碎成糜浆；步骤二、盐解；糜浆中加入等体积的水，用NaOH溶液，调节pH值至8.0～9.0，按照每1kg糜浆加入5～10mL盐解液的比例，加盐解液搅拌，4～8℃保温2～4小时，过滤取上清液，所得固体重复盐解工序一次，收集全部上清液，备用；步骤三、硫酸铵盐析；按每1L上清液加400g硫酸铵的比例，加入硫酸铵搅拌溶解，静置24小时，过滤，上清液重复盐析工序一次，所得固体即玻璃酸酶粗品；步骤四、透析；取玻璃酸酶粗品溶于水中，用HCl溶液，调pH值至4.0～7.0，在磷酸盐‑柠檬酸缓冲液中透析24小时，收集透析液，备用；步骤五、除热原；将透析液4℃离心30～60分钟，转速3000～4000r/min,过滤收集上清液，备用；步骤六、冻干；上清液调节pH值至6.5～7.0，冷冻干燥得玻璃酸酶精品。