一种红豆杉愈伤转化过程中农杆菌侵染的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，具体为一种红豆杉愈伤转化过程中农杆菌侵染的方法。本发明把红豆杉下胚轴作为外植体诱导愈伤组织，并经过培养获得胚性愈伤；用根癌农杆菌介导，采用农杆菌浸润的刀片切割红豆杉愈伤组织，将带有GUS基因的pCAMBIA1304质粒导入红豆杉愈伤组织，PCR检测外源潮霉素磷酸转移酶基因(HPT)的整合情况，组织化学方法检测GUS基因在组织中的表达情况，获得红豆杉的转基因愈伤组织；其中，刀面接触在愈伤组织的切面上形成一定的菌液梯度，从而覆盖转化所需的最佳菌液浓度，确保细胞得到成功转化，提高农杆菌转化的成功率，为红豆杉愈伤组织开展高效地遗传转化工程奠定的基础。

主权项

一种红豆杉愈伤转化过程中农杆菌侵染的方法，其特征在于：是在红豆杉愈伤遗传转化过程中，采用农杆菌浸润的刀片切割红豆杉愈伤组织块，使刀面接触的愈伤组织的切面上形成一定的菌液梯度，从而覆盖转化所需的最佳菌液浓度，确保细胞得到成功转化。